1、儀器與試藥

BJ-2型崩解儀（天津市國銘醫(yī)藥設備公司）；RCZ-8A型智能藥物溶出儀（天津大學精密儀器廠）； LC-10A 高效液相色譜儀（LC-10AD 泵，SPD-10AUV 檢測器，C-R7A 數(shù)據(jù)處理機），Shim-Pack-ODS

（6.0×150mm）柱；JL9200 激光粒度儀（濟南微納儀器有限公司）；葛根素對照品 （中國藥品生物制

品檢定所）；葛根藥材（購于陜西鎮(zhèn)平縣醫(yī)藥公司），經(jīng)鑒定為豆科植物野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi

的干燥根；SF-60 型普通粉碎機（常熟中藥制藥機械廠）；試驗型微粉機甲醇、乙醇為分析純。

2、實驗方法

2.1樣品制備

2.1.1葛根浸膏提取

取葛根粗粉850g，用85% 乙醇加熱回流提取三次，第一次加8倍量提取4小時，第二、三次各加

6倍量提取3小時，放出濾過，合并濾液，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度為1.32（70℃）放出即得。

2.1.2葛根細粉的制備及粒度分布檢查

細粉A：用普通粉碎機（羅底100目）將葛根片粉碎后再過200目細篩即得。

細粉B：每次取葛根片400g投進微粉機粉碎13分鐘（此時間經(jīng)實驗以100%過200目篩確定）放出即得。

粒度分布檢查：利用激光粒度儀對細粉A、細粉B的粒度（0.6～90µm）分布情況進行了檢測。

2.1.3片劑制備（素片）

片A：取葛根（850g）提取浸膏與細粉A 150g混合干燥，粉碎后過100目篩加適量淀粉、羧甲基

纖維素混勻，用70% 乙醇潤濕制粒、干燥整粒，加0.5%硬脂酸鎂混勻后壓片1000片（片重220mg）。

片B：取葛根（850g）提取浸膏與細粉B 150g 混合干燥，粉碎后過100目篩加適量淀粉、羧甲基

纖維素混勻，用70% 乙醇潤濕制粒、干燥整粒，加0.5%硬脂酸鎂混勻后壓片1000片（片重220mg）。

2.2溶出度研究

2.2.1色譜條件

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：甲醇-水（25∶75）；流速1ml·min-1；柱溫為室溫；

檢測波長為250nm。

2.2.2崩解度測定

按《中國藥典》2000年版一部片劑通則項下崩解時限的檢驗方法，取三批片A樣測得的崩解時限

分別為42±3min，44±2min，45±2min；取三批片B樣測得的崩解時限分別為43±3min，45±2min，

45±7min；均符合其規(guī)定。

2.2.3線性范圍

精密稱取葛根素對照品10mg，置25ml量瓶中，加30%乙醇稀釋至刻度，搖勻；分別精密量取0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml，置10ml 量瓶中，用30%乙醇稀釋至刻度，在上述色譜條件下測定葛根素

色譜峰面積。以濃度C為橫坐標,峰面積A為縱坐標，按最小二乘法進行線性回歸, 得回歸方程C=7.92

×10-2A – 1.86×10-1,r=0.9992，葛根素含量在20～200µg·ml-1線性關系良好。

2.2.4樣品中葛根素含量測定

取愈風寧心片10片（素片)，精密稱定，研細，取細粉約50mg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精

密加入30%乙醇50ml，閉塞稱定重量，超聲處理20min，稱定重量，用30%乙醇補足減失的重量，搖

勻，濾過，取續(xù)濾液作供試品溶液；取供試品溶液10µl，進樣測定，得片A的含量為13.62mg/片(n=3)，

片B的含量為17.43mg/片（n=3）。

2.2.5溶出度測定

按照《中國藥典》2000年版二部溶出度測定方法中的第一法測定，以水為釋放介質，每只轉籃中

放置3片，測得的溶出量為平均溶出量；轉速為100r.min-1，平行對片A、片B各測6組。

3、結果

3.1細粉A、細粉B的粒度分布測試結果

表1  細粉A的粒度分布情況

   序號   粒度（um）  體積%    累積%    序號   粒度（um）   體積%    累積%                                                        

1     0.6-1.2      0.000      0.00      15     27-30        2.302      14.59

2     1.2-3.0      0.000      0.00      16     30-34        2.532      17.12

3     3.0-4.5      0.006      0.01      17     34-38        3.276      20.40

4     4.5-6.2      0.372      0.38      18     38-42        3.757      24.16

5     6.2-7.6      0.534      0.91      19     42-46        4.102      28.26

6     7.6-9.2      0.802      1.71      20     46-50        4.306      32.57

7     9.2-11.4     0.871      2.58      21     50-54        4.402      36.97

8    11.4-12.8     1.089      3.67      22     54-58        4.688      41.66

9    12.8-14.2     1.102      4.77      23     58-62        10.372     52.03

   10    14.2-15.8     1.123      5.89      24     62-66        14.249     66.28

   11    15.8-17       1.151     7.04       25     66-70        17.901     84.18

   12    17-20        1.301     8.34       26     70-75        15.618     99.80

   13    20-24        1.682     10.02      27     75-80        0.201      100.00

   14    24-27        2.266     12.29      28     80-90        0.000      100.00          

表2  細粉B的粒度分布情況

  序 號   粒度（um）  體積%    累積%      序 號     粒度（um）  體積%    累積%                                                        

1     0.6-0.9      0.000     0.00         15       14-17         5.167    32.32

2     0.9-1.3      1.824     1.82         16       17-20        6.079     38.40

3     1.3-2.0      3.445     5.27         17       20-24        6.890     45.29

4     2.0-2.5      1.216     6.48         18       24-28        7.599     52.89

5     2.5-3.2      0.810     7.29         19       28-32        7.801     60.69

6     3.2-4.0      1.014     8.31         20       32-36        7.497     68.19

7     4.0-5.2      1.419     9.73         21       36-40        7.36      75.58

8     5.2-6.0      0.912     10.64        22       40-45        7.194     82.78

9     6.0-6.8      1.216     11.85        23       45-52        6.687     89.46

10    6.8-7.7      1.722     13.58        24       52-60        5.268     94.73

11    7.7-8.7      2.330     15.91        25       60-70        3.445     98.18

12    8.7-9.9      3.040     18.95        26       70-75        1.732     99.91

13    9.9-12      3.749     22.70        27       75-80        0.089     100.00

14    12-14       4.458     27.15        28       80-90       0.000      100.00                                              

注：200目篩孔內徑為75μm，300目篩孔內徑為47μm，5μm相當于2000目。

3.2溶出度測定結果

表3  愈風寧心片累積溶出率(%)

       時間/min      A          B       時間/min      A            B

        10        3.2±1.6    6.5±7.2    40       42.9±1.5   71.3±1.4

        15        7.8±8.1   16.2±1.4    45       56.2±2.3    82.4±1.8

        20       11.5±5.3   26.7±2.1    50       62.1±5.6    91.6±4.1

        25       17.8±4.3   34.2±1.7    55       66.8±7.5    93.2±5.8

        30       24.6±6.1   45.6±8.2    60       69.6±6.4    96.8±5.2

        35       31.4±2.6   56.4±5.2          

注：n=6

3.3片A、片B溶出度比較

表4  愈風寧心片溶出度比較

樣  品                  T50/min             P

A                    43.2±6.1          <0.01

                B                    32.5±3.5

 

3.4同種粉碎工藝技術制備不同批次制劑的溶出度穩(wěn)定性比較

表5 愈風寧心片不同批次間溶出度比較

樣  品    批   號            T50/min            P

                       010426            43.5±5.6

               A       010427            48.6±2.6         <0.05

                       010428            58.5±6.2

                       010424            32.8±1.7

                B      010422            33.2±3.4         >0.05

010421            33.0±1.2

 

4、討論

4.1植物細胞中的有效成份需經(jīng)過浸潤、溶脹、滲透和擴散方能溶出，超細粉碎技術一方面可使生

藥細粉的表面積大大增加，提高藥物的溶出速度，從而有利于藥物的吸收[4]；另一方面超細粉碎技術

可使植物藥細胞破壁率達90%，從而使植物細胞中的有效成份直接暴露出來并進入體液，提高其生物

利用度[5]，這是本實驗中超細粉碎技術制得的制劑溶出度遠大于普通粉碎技術制得的制劑的原因所在。

有關本實驗制劑的生物利用度有待進一步研究。

4.2固體制劑的溶出度與原輔料的物化性質、制劑工藝等因素密切相關，不同廠家因采用不同的原

輔料和生產(chǎn)方法，必然造成溶出度有較大差異，建議應通過研究對愈風寧心片溶出度作出統(tǒng)一的評價

標準及控制標準，以此保證其臨床療效。

4.3采用普通粉碎技術獲得的愈風寧心片不同批次間溶出度存在較大差異，原因可能與其獲得的藥

粉不能全部位過篩有關，葛根纖維性較強，利用普通粉碎機不能加工至全部位達到微米中藥(1～75µm)

的細度，不僅每次粉碎所得的細粉在粒度上差異大， 而且在所含組織或部位上亦有差異，進而所含有

效成份也就不同；超細粉碎經(jīng)過試驗確定出全過篩（200目）粉碎時間是以藥材全部入

藥為前提的，所以各批次之間差異很小，由此看來， 利用超細粉碎技術獲得的生藥粉制劑，更符合中

醫(yī)處方用藥的要求。

4.4轉籃法測定溶出度通常為每籃放1片，考慮到本實驗含量測定方法的線性范圍及片劑的葛根素

含量，改為每籃放3片。